
تعداد نشریات | 13 |
تعداد شمارهها | 622 |
تعداد مقالات | 6,489 |
تعداد مشاهده مقاله | 8,610,110 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 8,200,580 |
شناسایی و بررسی سیلیمارین قارچ اﻧﺪوﻓﻳﺖ ﺟﺪاﺳﺎزی شده از بذر گیاه خارمریم (Silybum marianum (L) Gaert.) | ||
پژوهشهای تولید گیاهی | ||
مقاله 2، دوره 27، شماره 3، آذر 1399، صفحه 23-36 اصل مقاله (520.53 K) | ||
نوع مقاله: مقاله کامل علمی پژوهشی | ||
شناسه دیجیتال (DOI): 10.22069/jopp.2020.16167.2462 | ||
نویسندگان | ||
هدی السادات عقیلی1؛ حسین مرادی* 2؛ محمد علی تاجیک قنبری3؛ ولی الله قاسمی4 | ||
1دانشجوی کارشناسیارشد باغبانی، گروه باغبانی، دانشکده علوم زراعی، دانشگاه علوم و کشاورزی و منابع طبیعی ساری، ایران | ||
2استادیار گروه باغبانی، دانشکده علوم زراعی، دانشگاه علوم و کشاورزی و منابع طبیعی ساری، ایران | ||
3دانشیار گروه گیاهپزشکی، دانشکده علوم زراعی، دانشگاه علوم و کشاورزی و منابع طبیعی ساری، ایران | ||
4استادیار پژوهشکده ژنتیک و زیست فناوری کشاورزی طبرستان، ساری، ایران | ||
چکیده | ||
مقدمه: خارمریم (Silybum marianum (L) Gaert.) از خانواده آستراسه است و سیلیمارین به عنوان ماده موثره با ارزش این گیاه شناخته میشود؛ که در درمان تعدادی از بیماریها، مانند بیماریهای کبدی مورد استفاده قرار میگیرد. چالکونسنتاز یکی از آنزیمهای کلیدی در تولید سیلیمارین میباشد. قارچهای اندوفیت بدون ایجاد بیماری، درون بافت گیاه زندگی کرده و تاثیر مفید بر مقدار تولید متابولیتهای ثانویه گیاهان دارند. اخیرا چندین قارچ اندوفیت از گیاه خارمریم (Silybum marianum (L) Gaert.) جدا شده و مطالعه شیمیایی و مولکولی آنها مورد توجه قرار گرفته است. بنابراین این پژوهش با هدف جداسازی قارچ اندوفیت از بذر گیاه خارمریم، بررسی و مقایسه سیلیمارین تولیدی قارچ و گیاه، همچنین بررسی توالیهای آمینواسیدی چالکونسنتاز مربوط به گیاه خارمریم (L Silybum marianum.) و چند گونه قارچ دیگر از پایگاه اطلاعاتی NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov) انجام شد. مواد و روشها: بدین منظور بذرهای خارمریم از محوطه دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری جمعآوری و پس از ضدعفونی در محیط MS کشت شدند. پس از ظهور قارچ در محیط، قارچها در شرایط استریل به محیط PDA و بهمنظور خالصسازی، به محیط WA منتقل شدند. جدایههای رشد کرده به محیط PDB منتقل شده و پس از 10 روز استخراج سیلیمارین انجام شد. شناسایی مولکولی جدایه قارچ اندوفیت با تکثیر نواحی ریبوزومی انجام شد، سپس همردیفسازی توالی بدست آمده با توالیهای موجود در سایت NCBI با نرم افزار آنلاین BLAST مورد مقایسه قرار گرفتند و با رسم درخت فیلوژنی قارچ اندوفیت شناسایی شد. بررسی بیوانفورماتیکی چالکونسنتاز مربوط به گیاه خارمریم (L. Silybum marianum) و چند گونه قارچ دیگر یا استفاده از پایگاه اطلاعاتی NCBI دامنهها و موقعیتهای مشابه چالکونسنتاز بدست آمد و با برنامه clustalo پایگاه اطلاعاتی uniprot بررسی شد. سپس با نرمافزارCLC Genomics Workbench5.5.2 مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفته و جدول مشخصات آنها رسم گردید. درخت فیلوژنی مربوط به این توالیها با استفاده از نرمافزار Mega7 و با روش Neighbor- joining رسم شد. یافتهها: نتایج بدست آمده با دستگاه کروماتوگرافی با کارایی بالا، تولید سیلیمارین از قارچ را نشان داد. مقدار سیلیمارین برای نمونه برگ تهیه شده از گیاه خودرو در محوطه دانشگاه، ppm 079/33 و برای گیاه استریل درون شیشه ppm 183/17 و برای قارچ اندوفیت ppm 29/7 اندازهگیری شد. شناسایی مولکولی جدایههای بهدست آمده، با استفاده از نواحی ITS انجام و گونه آن،Alternaria alternata شناسایی گردید. همچنین بررسی فیلوژنی چالکونسنتاز به عنوان آنزیم کلیدی برای تولید سیلیمارین بین این گیاه و چند قارچ صورت گرفت؛ که بیشترین نزدیکی را در گیاه S. marianum به قارچ Alternaria sp نشان داد. نتیجهگیری: بررسی تولید سیلیمارین در قارچ جداسازی شده از بذرهای گیاه خارمریم، گیاه درون شیشهای و فضای باز همراه با مطالعه بیوانفورماتیکی مسیر تولید آنزیم چالکونسنتاز، نقش موثر قارچهای اندوفیتی را در تولید سیلیمارین مشخص کرد. همچنین این جدایه قارچی قادر به تولید سیلیمارین در شرایط آزمایشگاهی بود. | ||
کلیدواژهها | ||
آلترناریا"؛ اندوفیت"؛ سیلیمارین"؛ خارمریم"؛ HPLC | ||
مراجع | ||
1.Al-Hawamdeh, F.M., Shibli, R.A. andAl-Qudah, T.S. 2013. In vitro production of silymarin from Silybum marianum L. Med Aromat Plants. 1: 001. 2167-0412.
2.Ataei Salami, Tajik Ghanbari, Babayizad, M. and Mehdian, P. 2017. Isolation and identification of endophytic fungi in Sarakhs forest from Shahid Zareh forest. Third National Conference on Applied Microbiology. Babolsar. Mazandaran University. (In Persian)
3.Babakhanzadeh Sajirani, A. and Hasan Abadi, M. 2010. Interaction between Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR) and Endophytes with Medicinal Plants to Increase Production of Chemicals and Secondary Metabolites, National Conference on Environment and Plant Production. Semnan. Islamic Azad University. pp. 21-17. (In Persian)
4.Das, M., Prakash, H.S. and Nalini, M.S. 2017. Antioxidative and antibacterial potentials of fungal endophytes from Justicia wynaadensis Heyne: an ethnomedicinal rain forest species of western Ghats. Asian J. Pharm. Clin. Res. 10: 6. 203-209.
5.Devari, S., Jaglan, S., Kumar, M., Deshidi, R., Guru, S., Bhushan, S., Kushwaha, M., Gupta, A.P., Gandhi, S.G., Sharma, J.P. and Taneja, S.C. 2014. Capsaicin production by Alternaria alternata, an endophytic fungus from Capsicum annum; LC–ESI–MS/MS analysis. Phytochem. 98: 183-189.
6.El-Elimat, T., Raja, H.A., Graf, T.N., Faeth, S.H., Cech, N.B. and Oberlies, N.H. 2014. Flavonolignans from Aspergillus iizukae, a fungal endophyte of milk thistle (Silybum marianum). J. Nat. Prod. 77: 2. 193-199.
7.Fallah Huseini, H., Hemati, A.R. and Alavian, S.M. 2004. A review of herbal medicine: Silybum marianum. J. Med Plant. 3: 11. 14-24. (In Persian)
8.Hasanloo, T., Kossari, M., Mohajeri Naraghi, S. and Bagheri, M. 2008. Effect of Different Strains of Trichoderma harzianum on the Silymarin Content of Milk thistle (Silybum marianum) 6th Iranian Horticultural Science Congress, Rasht, Guilan University. (In Persian)
9.Hasanloo, T., Ahmadi, M., Khayyan Nequei, S.M. and Salehi Jouzani, G.R. 2013. Elicitation effects of fungal extracts on Silymarin accumulation in Silybum marianum (L.) gaertn hairy root culture. J. Med Plant. 4: 48. 25-39. (In Persian)
10.Kaul, S., Wani, M., Dhar, K.L. and Dhar, M.K. 2008. Production and GC-MS trace analysis of methyl eugenol from endophytic isolate of Alternaria from rose. Ann. Micro. 58: 3. 443-445.
11.Khalighi Sigaroodi, F., Jarvandi, S. and Taghizadeh M. 2013. Application of Medicinal Plants. Arjmand. Press, 248p. (In Persian)
12.Kordi, H., Aghdasi, M. and Khalafi, M. 2013. An investigation on flavonolignans in different organs of Silybium marianum L. in Gorgan region. Iran. J. Med Arom. Plant. 29: 3. 651-664.(In Persian)
13.Lou, J., Fu, L., Peng, Y. and Zhou, L. 2013. Metabolites from Alternaria fungi and their bioactivities. Molecules. 18: 5891-5935.
14.Nasiri Madiseh, Z., Mofid, M., Ebrahimi, M., Khyam Nekouee, S.M. and Khosravi Ahahli, M. 2010. Isolation of Taxol-producing endophytes fungi from Iranian yew (Taxus baccata L.).J. Shahrekord Univ. Med. Sci.11: 4. 101-106. (In Persian)
15.Omidbaigi, R. 2009. Production and Processing of Medicinal Plant. Behnashr. Press, 440p. (In Persian)
16.Rahimi, N., Nazeri, S. and Mirzaei, S. 2013. Taxol production by endophytic fungi isolated from Corylus avellana. Arak. Med. Univ. J. 16: 37-44. (In Persian)
17.Raja, H.A., Kaur, A., El-Elimat, T., Figueroa, M., Kumar, R., Deep, G., Agarwal, R., Faeth, S.H., Cech, N.B. and Oberlies, N.H. 2015. Phylogenetic and chemical diversity of fungal endophytes isolated from Silybum marianum (L) Gaertn.(milk thistle). Mycology. 6: 1. 8-27.
18.Schmid, J., Doerner, P.W., Clouse, S.D., Dixon, R.A. and Lamb, C.J. 1990. Developmental and environmental regulation of a bean chalcone synthase promoter in transgenic tobacco. The Plant Cell. 2: 7. 619-631.
19.Seshime, Y., Juvvadi, P.R., Fujii, I. and Kitamoto, K. 2005. Discovery of a novel superfamily of type III polyketide synthases in Aspergillus oryzae. Biochem. Biophys. Res. Commun.331: 253-260.
20.Strobel, G. and Daisy, B. 2003. Bioprospecting for microbial endophytes and their natural products. Bioprospecting for microbial endophytes and their natural products. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 67: 4. 491-502.
21.Torres, M. and Corchete, P. 2016. Gene expression and flavonolignan production in fruits and cell cultures of Silybum marianum. J. Plant Physiol. 192: 111-117. | ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 765 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 549 |